Savillex PFA制品在医学研究上的应用案例（四）
——人类巨噬细胞对Erdman、H37Rv和H37Ra菌株LAM的摄取能力的研究
说明：本文内容均来源于以下论文
《Differences in mannose receptor-mediated uptake of lipoarabinomannan from virulent and attenuated strains of Mycobacterium tuberculosis by human macrophages》
作者：L S Schlesinger, T M Kaufman, S Iyer, S R Hull, L K Marchiando
发表于：《
The Journal of Immunology》，第 157 卷，第 10 期，1996 年 11 月，第 4568 - 4575 页
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Savillex相关PFA实验器皿：
Savillex PFA Jar PFA Closure PFA Well
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Savillex PFA制品优势：极低吸附性及化学惰性利于3D细胞培养，可干热灭菌。
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论文摘要（翻译）：
结核分枝杆菌强毒株Erdman和H37Rv（而非减毒株H37Ra）被人类巨噬细胞吞噬的过程，除补体受体外还需甘露糖受体（MR）介导。我们最新研究发现，Erdman菌株的主要荚膜脂阿拉伯甘露聚糖（LAM）在细菌被吞噬时可作为MR的配体。本研究直接比较了人类巨噬细胞对Erdman、H37Rv和H37Ra菌株LAM的摄取能力，并评估了MR在此过程中的相对贡献。
以LAM包被的微球作为模型吞噬颗粒，用于研究LAM作为荚膜配体的特性。单核细胞源性巨噬细胞在37℃条件下对Erdman LAM微球的摄取量最高，H37Rv和H37Ra LAM微球次之，均显著高于缓冲液微球或非结核分枝杆菌AraLAM包被的微球。在甘露聚糖或甘露糖-BSA存在时，微球摄取抑制率呈现梯度差异：Erdman LAM（分别为75±8%和50±7%）> H37Rv LAM（57±13%和21±5%）> H37Ra LAM（36±16%和22±11%）。抗MR抗体对微球摄取的抑制率也呈现相同趋势：Erdman LAM（80±9%）> H37Rv LAM（53±1%）> H37Ra LAM（26±12%）。
4℃条件下，Erdman LAM、H37Rv LAM和H37Ra LAM包被微球的附着能力分别比AraLAM微球提高12倍、5倍和4倍，而甘露糖-BSA可抑制这些微球的附着（抑制率分别为82±7%、69±8%和12±17%）。半乳糖-BSA对所有LAM微球组的附着均无抑制作用。色谱分析显示，三种菌株LAM的温和酸水解产物均含有末端二甘露糖单元。
本研究证实：尽管不同结核分枝杆菌菌株的LAM均含有末端二甘露糖单元，但其介导巨噬细胞粘附及作为MR配体的能力存在显著差异。这些发现提示，LAM分子中还存在其他细微的结构差异，这些差异会影响其与人类吞噬细胞的初始相互作用。
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材料与方法（翻译节选）：
单核细胞源性巨噬细胞的制备
本研究选取四名健康成年志愿者作为血样来源，所有志愿者均符合以下条件：结核菌素纯蛋白衍生物试验阴性、无结核病临床病史、无明确结核病例接触史。采用肝素抗凝全血通过菲可-泛影钠（Pharmacia）密度梯度离心法分离外周血单个核细胞（PBMCs），随后将细胞接种于
聚四氟乙烯培养罐（(Savillex Corp., Minnetonka, MN）中，在含20%自体血清的条件下培养5天（参考文献2）。实验当日，从聚四氟乙烯培养罐中取出PBMCs，经充分洗涤后，将细胞悬液置于平底培养板（Falcon, Becton Dickinson Labware, Lincoln Park, NJ）中，在含RPMI-HEPES-HSA的培养液环境下，通过2小时铬酸清洁（(Fisher Scientific Co.）盖玻片贴壁法纯化单核细胞源性巨噬细胞（MDMs）组分。每孔接种约2.0×10⁵个MDMs。
说明：以上仅为论文部分内容节全，如需了解更多内容或获取原文可添加客服微信
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