Savillex PFA制品在医学研究上的应用案例（五）
——结核分枝杆菌调控MDR1及诱导耐药性的作用机制的研究
说明：本文内容均来源于以下论文
《Effect of Mycobacterium tuberculosis Enhancement of Macrophage P-Glycoprotein Expression and Activity on Intracellular Survival During Antituberculosis Drug Treatment》
作者：Qian Wu , Austin Hossfeld , Abigail Gerberick , Noushin Saljoughian , Charu Tiwari , Smriti Mehra , Latha Prabha Ganesan , Daniel J Wozniak , Murugesan V S Rajaram
发表于：《
The Journal of Infectious Diseases》, 第 220 卷，第 12 期，2019 年 12 月 15 日，第 1989 - 1998 页
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Savillex相关PFA实验器皿：
Savillex PFA Jar PFA Closure PFA Well
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Savillex PFA制品优势：极低吸附性及化学惰性利于3D细胞培养，可干热灭菌。
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论文摘要（翻译）：
背景：结核病由结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis）引起。近年来多重耐药（MDR）结核菌株的出现严重威胁结核病的防控。然而，巨噬细胞多重耐药基因MDR1在抗结核药物治疗期间对胞内结核分枝杆菌存活的作用机制尚不明确。
方法：本研究采用人单核细胞源性巨噬细胞模型，探究结核分枝杆菌调控MDR1及诱导耐药性的作用机制。
结果：研究发现：结核分枝杆菌感染可上调巨噬细胞MDR1表达，通过外排结核药物等多种化学物质促进胞内菌存活。其调控途径涉及巨噬细胞感染后，通过上调miR-431抑制热休克因子1（MDR1的转录调控因子）。值得注意的是，非致病性耻垢分枝杆菌（Mycobacterium smegmatis）未引起MDR1表达升高，提示致病性结核分枝杆菌需主动分泌毒力因子以产生该表型。最终实验证实，抑制MDR1可增强抗生素对结核分枝杆菌的杀灭效果。
结论：本研究首次揭示：结核分枝杆菌在感染过程中上调MDR1表达，导致细菌仅暴露于亚致死浓度的抗菌药物。这种微环境不仅促进细菌存活，还可能加速耐药变异的产生。
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材料与方法（翻译节选）：
人单核细胞源性巨噬细胞的分离与培养
本研究采用经俄亥俄州立大学机构审查委员会批准的实验方案，从结核菌素纯蛋白衍生物（PPD）阴性的健康志愿者体内获取样本制备人单核细胞源性巨噬细胞（hMDM）单层。简要步骤如下：首先通过肝素抗凝血经Ficoll密度梯度离心分离外周血单个核细胞（PBMCs），随后将细胞接种于
聚四氟乙烯培养罐（Savillex）中，在含20%自体血清的条件下培养5天。
培养后的PBMCs中的hMDMs在含10%自体血清的培养液中，于37℃、5%二氧化碳条件下贴附于组织培养板（Falcon；Becton Dickinson Labware）2-3小时。随后洗去淋巴细胞，hMDM单层补充含10%自体血清的Roswell Park Memorial Institute 1640培养基（RPMI 1640），并继续孵育过夜。
说明：以上仅为论文部分内容节全，如需了解更多内容或获取原文可添加客服微信
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