Savillex PFA制品在医学研究上的应用案例（二）
——一种从新鲜外周血单个核细胞或纯化的单核细胞中生成人肺泡巨噬细胞样（AML）细胞的方案
说明：本文内容均来源于以下论文
《Protocol to develophumanalveolarmacrophagelike cells from mononuclear cells or purified monocytes for use in respiratory biology research》
作者：Susanta Pahari，Anna-Lena Neehus，Bruce C. Trapnell, Jacinta Bustamante, Jean-Laurent Casanova, Larry S. Schlesinger
发表于：《STAR Protocols》，第5卷，第2期，2024年6月21日
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Savillex相关PFA实验器皿：
- Teflon jar 2 fL. Oz/60 mL (holds 7–8 mL volume) Savillex Cat# 100-0060-01
- Teflon wells lids, 53 mm Closure Savillex Cat# 600-053-01
- Teflon jar 4 fL. Oz/120 mL (holds 13–15 mL volume) Savillex Cat# 100-0120-01
- Teflon well lids, 70 mm closure Savillex Cat# 600-070-01
Savillex PFA Jar PFA Closure PFA Well
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Savillex PFA制品优势：极低吸附性及化学惰性利于3D细胞培养，可干热灭菌。
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论文摘要：
人肺泡巨噬细胞是一种独特的髓系细胞亚群，对研究肺部疾病至关重要，但难以获取。本文提出了一种从新鲜外周血单个核细胞或纯化的单核细胞生成人肺泡巨噬细胞样（AML）细胞的方案，详细描述了细胞分离、肺表面活性物质与肺相关细胞因子混合培养、表型分析以及与真实肺泡巨噬细胞的比对验证步骤。此外，我们还详述了质量控制流程及微生物反应监测的技术指标。关于该方案的具体操作与应用细节，请参阅Pahari和Neehus等人的研究
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材料与方法（节选）：
将
2800万外周血单个核细胞（PBMCs）/纯化单核细胞以
14 mL体积 接种于
大号聚四氟乙烯培养罐（Savillex，4 fl. Oz./120 mL，货号# 100-00120-01）中。
替代方案： 小号聚四氟乙烯培养罐（Savillex，2 fl. Oz./60 mL，货号# 100-0060-01）：
1400万细胞，
7 mL体积，含
10%自体血清。
关键步骤：
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轻轻旋紧罐盖，以确保
CO₂气体交换，并将其置于
37℃/5% CO₂培养箱 中。
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Savillex聚四氟乙烯培养罐的优势 在于其
非粘附特性，可使单核细胞在
相对非贴壁 状态下分化为巨噬细胞。相较于贴壁单层培养，该方法使细胞在分化过程中
代谢活性较低，且所得巨噬细胞在后续实验中
存活时间更长。
替代方法： 可使用
未经组织培养处理的6孔板。目前尚未深入探索其他用于培养AML细胞的容器，但可根据各实验室现有方案进行尝试。
说明：以上仅为论文部分内容节全，如需了解更多内容或获取原文可添加客服微信
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